DOTMA在脂质体转染实验中的实验步骤
脂质体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DPE的混合物(1:1)。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前条件下方面的转染方法之转染率高,优于磷酸钙法,比它高5-100倍,能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时,首先需要优化转染条件,应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等,对每批LR都要做,先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间,DNA可从1-5ug和孵育时间6h,开始按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线,再选用LR和DNA两者zui佳的剂量,确定出转染时间,因LR对细胞有一定的毒性,转染时间以不超过24h为宜。
339 人阅读发布时间:2022-06-28 15:18